单模块定位显微镜化高分辨率成像雷竞技怎么下载允许高精度量化它们的大小、分子内容和细胞吸收/移植过程
SMLM:
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EV子群在很大程度上由粒子大小决定,这也可能在细胞吸收中起作用。单片介片内分解值上限接近200纳米精确和可复制纳米测量所有EV子群对EV特征化和提升我们对EV生物的理解至关重要
SMLM提供独特的可靠实用方法分级EVsEV粒子易分解并计算粒子大小分布
SMLM是一种独特的EV成像法,能:
雷竞技怎么下载分子货运内容是引导EV研究的关键点雷竞技怎么下载EV摄取对生化功能的影响 和目的细胞行为直接相关雷竞技怎么下载高精度分子内容/构件特征分析对探索EV中介手机通信机制问题至关紧要
雷竞技怎么下载SMLM使用免疫线性标签瞄准薄膜蛋白和货品,既可可视化又可量化具体的薄膜蛋白并判定特定微粒子的成分(例如蛋白质、脱氧核糖核酸、RNA和脂质)-信息显示传统EV成像方法无法确定单值EV
鉴于EV可包含各种货品,持续研究将涉及方法,如蛋白质组学或排序结合超分辨率显微镜使用合并协议对发现特定单元格生成EVs完全组成特别相关
EV摄取机制 和细胞间生物基本载量转移 可能对疾病病理有重大影响到目前为止,我们对这些机制的理解一直受传统EV测量技术能力约束
SMLM提供检测、跟踪和研究EV摄取和货运所需的一致性、分辨率和单模块敏感度
能力包括:
活动可深入了解启动并影响输入选择机制与分子、输入过程和EVs输入细胞后归宿此类洞察力可能有助于开发各种病理(如癌症转移、病毒感染和免疫响应)基于EV的治疗方法,比当前治疗方法有效得多。
EV计数和运货可提供各种疾病病理学的重要信息结果EVs有潜力发挥优秀生物标志作用,使研究人员能够:
SMLM独有能力组合-特别是检测、分类、大小、计数、跟踪和确定单片级EV内容-SMLM是发现EV生物标志的理想EV研究方法
与SMLM相比,测量EV的传统方法在功能上和实际上受限制,这些限制可能复杂甚至防止使用EVS, 特别是在新应用和探索新研究题时使用EVS
电子显微镜片和受偏差限制荧光片片片段雷竞技怎么下载微信允许高分辨率精确尺寸测量,但缺少标签和图像专用分子内容能力雷竞技怎么下载反之,受偏差限制的荧光显微镜可有特征地图像分子内容,但无法精确测量EV大小此外,受偏差限制模式不提供评价单个Evs目标分布的必要解析
全看全表容量限制测量方法下文
测量能力 | ||||||||
单矢量 | 批量EVs | 流水体大小 | 载运物 | 单值EVs目标分布 |
单细胞EV | 准确性 | 最小目标大小 | |
Super-Resolution Microscopy/SMLM |
✓ | ✓ | ✓ | ✓ | ✓ | 高精度 | 下至20纳米 | |
南粒跟踪分析 | ✓ | ✓ | ✓ | 常高估 |
下至~100nm | |||
电子显微镜 | ✓ | ✓ | EM定点 < 20NM可减少 |
<20nm | ||||
可耐受性脉冲感测 | ✓ | 常高估 |
下至40纳米 | |||||
动态光散射 | ✓ | 常高估 |
下至50纳米 | |||||
流线几何 | ✓ | ✓ | 下至50纳米 | |||||
西布洛丁 | 仅前缀 | |||||||
质谱 | 仅前缀 | |||||||
排序法(RNA,脱氧核糖核酸) | RNA/DNA专用 |
SMLM为研究EVs提供独特的单片解法分辨率、精度和功能组合可高精度成像分析单个EVs,以便计数、尺寸、计量载荷并跟踪特定EVs归宿而无需额外仪表或方法
必须指出,超分辨率显微镜研究的适当荧光标志确实需要了解潜在的蛋白质内容这并不严重妨碍SMLMEE研究应用所有EV似乎都有一个或多片类蛋白质(例如CD9、CD63、CD81)这些都是广受接受的典型EV标志用于荧光显微镜研究(包括超分辨率显微镜学)。
SMLM提供单度测量模式
可靠识别特定单元生成的EV类型可以通过单模块定位测量孤立EVs实现,像从培养细胞外流取或体液样本中显示的EVs
SMLM可用于获取所有EV子群的精确和可复制纳米尺度测量-包括poticbodies(500-2000纳米直径)、微粒子片(100-1000纳米直径)和Exsocomes(40-100纳米直径)。
识别未知EV中的蛋白质需要与超分辨率显微镜并用蛋白学技术合并协议对发现特定单元格生成的特定EV完全组成特别相关
探针技术如DNA-PAINT可如何用于生成已知EVs蛋白质多路视图,并提供未知EV筛选工具,也很有趣核粒子宏模(DNA和/或RNA)也可以使用单序标签策略,如olioSTORM需要判定序列确定后SMLM可个人EV使用
雷竞技怎么下载SMLM使用免疫光栅标签锁定薄膜蛋白和货品,可视觉化并标上特定的薄膜蛋白并判定特定微粒的成分组成含核素货物可使用寡头荧光标签
smlm获取高分辨率细胞图像,无论是培养或组织中,然后对已知组成单值EV贴荧光标签,用Smlm实现评估细胞项及其后果雷竞技怎么下载这使研究者识别并跟踪任何特定EV摄取量及其分子货运归宿