属分枝杆菌包括了重要的病原体结核分枝杆菌复合体(MTC)和非结核分枝杆菌(NTM)。NTM日益成为机会性感染的原因。这种趋势以及该属中抗生素耐药性的上升需要改进分枝杆菌种间的分化。
不同分枝杆菌种类之间的抗菌药物敏感性差异使得微生物实验室的鉴定下降到物种水平至关重要。分枝杆菌鉴定的传统方法,主要是基于培养的表型方法,可能需要数周时间,而且往往不准确。
商业分子方法的发展,如核酸杂交探针,显著改善了周转时间,但可能缺乏特异性。雷竞技怎么下载像16S rDNA这样的目标基因测序是非常快速和高度准确的,但昂贵且不广泛使用。
最近出现的先进质谱(MS)技术,特别是基质辅助激光解吸/电离飞行时间(MALDI-TOF) MS,使微生物实验室能够掌握分枝杆菌鉴定的挑战。无与伦比的速度仪器,如布鲁克的MALDI生物打字机®(MBT)系统除了易用性增强、特异性高和每次检测成本显著降低之外,MALDI-TOF质谱还将成为分枝杆菌鉴定的首选技术。
可选的MBT分枝杆菌RUO模块用于MALDI生物分型器®由特定参考谱库和软件模块组成。
MBT将未知生物的质谱与专用参考质谱库进行比较,后者涵盖了目前已知的201种分枝杆菌中的182种。该MBT分枝杆菌文库可方便地用于独立于液体或固体培养基上生长的样品。
MBT分枝杆菌RUO软件模块允许处理比大多数其他细菌获得的更具挑战性的质谱。标记为分枝杆菌的样品将经过优化的采集方法,并自动将光谱与MBT分枝杆菌RUO库进行比较,以进行敏感和特异性鉴定。
分枝杆菌对MALDI-TOF质谱分析比其他大多数细菌更具挑战性。它们坚硬的细胞壁需要一种苛刻的方法来释放核糖体蛋白,而且由于典型的低代谢,核糖体蛋白的含量也不那么丰富。由于MALDI-TOF质谱鉴定主要基于对核糖体蛋白的分析,因此需要专门的样品制备方法来获得高质量的光谱。
分枝杆菌样品制备的另一个重要步骤是安全灭活细菌,在鉴定结果已知之前,应将其视为生物安全3级生物。
与其他程序不同,新的MBT分枝杆菌试剂盒的失活方法不涉及煮沸。在室温下,用灭活试剂孵育,通过机械破坏细胞聚集体支持灭活过程,可以方便地灭活分枝杆菌。
MBT分枝杆菌试剂盒适用于在液体和固体培养基中培养的分枝杆菌的样品制备,并将总体动手时间从1小时以上减少到45分钟以下。
仅供研究使用。不用于临床诊断程序。
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