DNA-PAINT成像
探索DNA-PAINT解决方案
多路复用，多色DNA-PAINT成像的唯一开箱即用的解决方案
结合Bruker的软件控制，自动化，完全集成微流体装置,Vutara VXL超分辨率显微镜唯一的商业系统提供开箱即用的多路DNA-PAINT功能。在这些工具上，DNA-PAINT成像可以在单分子定位显微镜下实现10纳米以下的定位精度具有无限的多路复用潜力．
此外，Vutara显微镜与微流体系统提供了额外的好处:
- 无麻烦的设置与专家服务和支持，以加快时间的数据收集
- 结果比改造系统收集的数据更可靠和可重复
- 自动化和多条件/多用户编程，易于扩展的实验设计
什么是dna涂料?
什么是DNA-PAINT?
DNA-PAINT是一种通过用荧光团标记的短(<10个核苷酸)寡核苷酸与结合到目标分子(通常是抗体)的互补寡核苷酸结合来实现单分子定位的技术。它允许广泛的成像模式，从全细胞广泛的z堆栈到高分辨率的多目标图像。
了解DNA-PAINT成像的优势
- 更高的光子产量:眨眼通常比传统的dSTORM更持久。这导致荧光团产生更高的光子，因此与dSTORM和PALM等方法相比，可以获得更高的定位精度(<10 nm)。
- 几乎无法漂白的图像:样品沐浴在过量的荧光团，允许极其持久的成像。
- 无限多路复用潜力:由于靶标的特异性是由核苷酸序列决定的，因此使用正确的工具可以用不同的寡核苷酸序列标记多个靶标。使用Vutara的集成微流体单元，可以从样品中清洗给定目标的成像链，并添加标记不同生物目标的不同成像链。
DNA-PAINT是如何工作的?
DNA-PAINT是如何工作的?
DNA-PAINT的工作原理是将含有荧光团的短“成像寡核苷酸”与互补寡核苷酸(称为“对接链”)在感兴趣的目标(如抗体、纳米体、适体或自杀酶配体)上短暂结合。
使用DNA-PAINT超分辨率显微镜
DNA-PAINT超分辨率成像包括以下几个步骤:
- 通过常规技术将样本标记为“对接链”，并准备成像。
- 为了成像，样品沐浴在成像缓冲液(通常是PBS，但可以包括氧清除剂)和低浓度(通常为0.1-1 nM)的成像低聚物中，与对接链互补。成像寡核苷酸长度通常为9-10个核苷酸，并包含一个荧光团。我们推荐Cy3B用于DNA-PAINT，因为它具有荧光性，因此背景较低。
- 一旦进入成像缓冲液，样品就可以成像。成像链到对接链的瞬态绑定阻止了荧光团的扩散，使其能够在相机上成像。
由于样品沐浴在大量过剩的不断交换的成像链中，目标基本上是不可漂白的，这使得批量处理大量帧和扩展z堆栈成为可能。
为什么使用dna paint ?
为什么使用DNA-PAINT进行3D细胞超分辨率成像?
高精度定位
DNA-PAINT允许10纳米以下的定位精度，使其成为最精确的显微镜技术之一。
在这里，使用Vutara显微镜和水浸1.2 NA物镜进行DNA-PAINT实验。该图像显示了一个完整的BS-C-1细胞的微管蛋白网络，标记有结合DNA-PAINT二抗的微管蛋白抗体。插图显示了微管蛋白网络的放大部分。微管腔清晰可见。
多色不可漂白成像
DNA-PAINT使多路多色超分辨率成像成为可能。
DNA-PAINT具有大规模多色z -堆叠的潜力，因为样品沐浴在几乎无限供应的荧光团中。这使得由数百万个定位组成的大规模z-stack成像成为可能。
在Vutara单分子定位显微镜上进行了双色DNA-PAINT实验。微管蛋白用青色标记，网格蛋白用洋红色标记。此外，由于DNA-PAINT的不可漂白性质，大型z堆栈是可能的。
无限的多路复用潜力
DNA-PAINT在多重成像方面具有巨大潜力。
在这里，使用Vutara VXL和集成流体单元进行了多靶点DNA-PAINT实验。在不同的探测器上使用正交对接链，可能有无限数量的目标。
另一张图片是在Vutara单分子定位显微镜和集成流体单元上进行的四靶点DNA-PAINT实验。f -肌动蛋白品红色，汤20 -青色，微管黄色和网格蛋白绿色。
样品图片
样本图像:DNA-PAINT用于改进超分辨率成像
BS-C-1标记抗微管蛋白、肌动蛋白、抗tom20和抗网格蛋白。正交2ºDNA-PAINT抗体购自Massive-Photonics.com．
