OT-AFM组合系统结合了AFM卓越的表面力测量和成像能力,以及光镊在3D中应用和测量最小力的能力。
OT-AFM组合系统结合了AFM卓越的表面力测量和成像能力,以及光镊在3D中应用和测量最小力的能力。这种组合装置满足了机械稳定性、灵活性和模块化的最高要求。特别设计的OT-AFM ConnectorStage是将NanoWizard或CellHesion家族中的任何AFM与研究级倒置光学显微镜上的NanoTracker光镊相结合的关键。
OT提供的3D定位、检测和操作的独特组合,以及AFM的高分辨率成像和表面特性表征,开辟了一个全新的应用领域,如细胞反应、细胞-细胞或细胞基质相互作用、免疫反应、感染或细菌/病毒/纳米颗粒摄取过程等等。
通过大量可用的处理,交互和检测位点,OT-AFM显著扩展了单分子应用的范围。
1.DNA发夹解压缩(AFM),而光学陷阱可用于抑制(高激光功率)或量化旋转(低激光功率)。
2.扫描修饰过的DNA分子。带有DNA结合蛋白的分子(绿色)横跨在两个光学捕获的珠子之间。功能化的AFM尖端(蓝色)沿着分子扫描,每当dna附着的蛋白质与尖端发生相互作用时,这些都可以在AFM和OT信号中检测到。
3.dna酶(如聚合酶、解旋酶)动态监测。当一条链附着在一个被光学捕获的粒子上时,就可以跟踪逐级运动。闭环力夹紧允许在单链上保持恒定的力。
细胞反应、细胞-细胞或细胞基质相互作用、免疫反应、感染或细菌/病毒/纳米颗粒摄取过程只是JPK最新技术OT-AFM平台可以研究的几个例子。JPKs经过验证的AFM和OT核心技术,结合荧光显微镜,为活细胞应用设定了最终基准。
[1] +[2]:功能化珠粒激活细胞,平行AFM测量。微粒子表面的信号分子在指定的位置和时间点与细胞接触。
[5] +[6]:机械敏感细胞受到周期力的刺激,由光学捕获粒子施加。细胞骨架的内部重排改变了细胞的力学特性。这些属性可以通过力映射或JPK的定量成像高级(QI-Advanced)等AFM方法轻松获取。
[3] + [4]: AFM可以同时用于监测细胞结构的变化,例如通过监测整个过程中的机械特性或通过分子识别力谱来研究膜蛋白的分布和机械行为。雷竞技怎么下载
利用功能化粒子或改性微生物触发细胞反应是一种常用的方法。由此产生的细胞结构、动力学和力学性能的变化可以使用基于afm的方法进行研究。然而,将对象传递到单元格上感兴趣的特定区域是很难实现的。OT提供了在精确的时间和位置操作样本并触发细胞反应的完美工具。这大大提高了这些研究的吞吐量、灵活性和可重复性。在这个应用中,树突状细胞(DCs)和调节性T细胞(T注册)对常规T细胞(Tconv)到相同的DC用OT-AFM定量。
[1]树突状细胞(DC)与常规T细胞(Tconv).Tconv连接到无尖悬臂上,然后接近表面束缚DC。将悬臂拉起,测量附着力。调节性T细胞(T注册)用光镊接在直流上并从直流上取下,以测试其对结合强度的影响。[2]+[3]测量设置。光陷阱(红色十字)移动T注册而粘附性测量是用悬臂连接的T进行的conv.[4]三种情况下测量的分离工作。Treg附着减少DC-Tconv交互。在T后面注册去除后,粘附水平几乎恢复。样本由北京卡尔加里大学/清华大学阎石提供。最初的实验是由Yan Shi等人设计的(已出版)。
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