Przewodnik po mikroskopii Raman
Ramn Mikroskopia Podstawy
拉曼要开玩笑吗?
哦，mikorskopii Raman
微拉曼(μ-拉曼)到powicszenie konwencjonalnej mikroskopii wiwietlnej i unikalnej identyfikacji chemicznej przez spektroskopię拉曼。
Obie techniki są doskich potzhazne same w sobie, ale razem oferują mozliwotzich chemicznego badania najmniejszych obiektów (> 0,5 μm)， a tym samym łączą dane spektralne z informacjami przestrzennymi。
W przeciwiezynstwie do mikroskopii podczerwieni, mikroskopy Raman są znacznie tatwiejsze prostsze, poniewa耶茨używają华沙耶茨，które jest kompatybilne z optyką szklaną。德拉戈特耶米罗斯库皮拉曼są czczsto opracowywane na podstawie bardzo wysokiej jakowicci mikroskopów optycznych。
O próbkowaniu我konfokalnoovich
Ogólnie i w zaleovnokoci od zadania analitycznego, w mikroskopii Raman nie są konieczne skomplikowane przygotowanie próbki。Zazwyczaj próbki są umieszczane豆荚mikroskopem, takie, jakie są。Co najwyeyj, przygotowuje się przekroje poprzeczne lub przycina się duze elementy są ciecte na wymiar, aby zmiewicic je na stoliku pomiarowym。
耶德纳克特纳达尔obowiązują te same ograniczenia dotyczzhece próbek, co w spektroskopii Raman, tzn。Próbka moze nie wykazywak silnej fluorescencji lub absorbancji dugugowici fali wzbudzenia。
Niektóre próbki wymagają konfokalnego mikroskopu Raman, który oferuje rozdzielczoovic przestrzenną we wszystkich trzech wymiarach。W ten sposób mokbna dokonywaic pomiarów wewntrz pojemników (np。szklane fiolki) lub charakteryzowaic próbki w 3D。
Kalibracja mikroskopu Raman
Aby uzyskak precyzyjne i wiarygodne wyniki μ-Raman, niezbluddna jest dokwadna kalibracja osi dugugokoci fali。Wiele zmian operacyjnych mikroskopu Raman ma zwykle mają mniej lub bardziej powaezne konsekwencje pod wzglyldem kalibracji liczby falowej。
(Re)Kalibracja jest przeprowadzana poprzez pomiar wzorca krzemowego, ale nowoczesne mikroskopy oferują ciągłą kalibrację dla maksymalnej wygody。
jekjli nie jest wykonywana w sposób cizhegzyy, to rekalibracja powinna byich przeprowadzana regularnie, a nawet po powinna drobnych regulacjach przyrządów, takich jak zmiany lasera, przysbony lub siatki, czy te耶扎波nagzyych wstrzzhesach i wibracjach, a takezmianach温，aby zapewnich pozyskiwanie optymalnych danych spektralnych。
Co开玩笑rozdzielczoovic spektralna?罗兹齐尔佐维奇，przestrzenna?
RozdzielczośćspektralnaOpisuje zdolnoovic do rozdzielania切赫spektralnych wich poszczególnych elementach。jeutli jest zbyt maska, niektóre sygnazyy spektralne znikają w szerokich“pasmach”。
耶耶利的笑话兹比特的杜耶扎，波米亚特的笑话到维玛噶涅的贝兹多达科维奇的科兹耶奇的德拉乌耶特科耶扎卡。德拉戈戈·瓦兹涅玩笑，阿比·维德兹耶克，贾卡·罗兹哲尔佐维奇，spektralna玩笑理想的dla danej próbki。To, co sprawia, zzdzielczozich jest "zbyt niska" lub "zbyt wysoka"， zalevy od aplikacji i wykonywanego zadania analitycznego。
Rozdzielczośćprzestrzenna笑话瓦布纳，波尼瓦耶扎普耶瓦娜到，杰克·奥斯特罗·维兹米·奥比克提。W mikroskopii Raman wazne jest rozróżnienie struktur W próbce。斯塔维德，im lepsza rozdzielczozhic przestrzenna, tym bardziej szczegółowe informacje są uzyskiwa。
rozdzielczoovic横向alna i osiowa zalevy od różnych parametrów。Aby osignivic najwyższą rozdzielczoovic w obu obszarach, nalevy uzyvic konfokalnego mikroskopu Raman。Zazwyczaj rozdzielczozich przestrzenna jest decydujagicym paramtrem w obrazowaniu Raman。
你是在开玩笑吗?Dlaczego jest tak wakbna dla Ramana?
W mikroskopii optycznej konfokalnoovic oznacza, ze ozhewietlone miejsce próbki i przyshona otworkowa W kociebce wizhezki mają ten sam punkt ogniskowy。W praktyce, zamiast caeyj próbki, tylko niewielka jej czkieki jest owietlona przez punktowe źródło华沙。nastzhepnie, otwór blokuje niezogniskowane wiwiatzo, zwiielkszajajcw ten sposób kontrast i głębię ostrowici。
Co开玩笑konfokalna mikroskopia拉曼?
Zasada ta mozake bych stosowana do spektroskopii Raman, zwizhakszajjzzzzzzzzzzzzduzuzosi x, y- (lateralna) i z (gjolobokokovic)， umozynliwiajh3c jednoczeennie profilowanie gicholowie gichbrobokowicci。Mikroskopy Raman mogą się jednak różnić w konstrukcji konfokalnej。
Prawdziwa konstrukcja konfokalna
Największą zaletą prawdziwego konfokalnego mikroskopu Raman jest niezaleovna kontrola rozdzielczowicci przestrzennej i spektralnej。奥西瓦加się到poprzez umieszczenie przyszynony otworkowej przed szczeliną wejściową spektrometru。兹米恩·普日斯拉夫尼特沃维kontrolują托普涅茨克·孔福卡尔诺维奇，podczas gdy szczelina wejkociowa steruje rozdzielczością spektralną spektrometru。Wadą tej konstrukcji są trudnowici napotkane podczas próby utrzymania obu przyszyon w idealnym ustawieniu w celu utrzymania optymalnej wydaknowicci。
Konstrukcja pseudo-konfokalna
W uproszczonej konfiguracji rozdzielczoikic przestrzenną moovna kontrolowic za pomocą kombinacji szczeliny wejkociowej W jednym kierunku, a rozdzielczoikic przestrzenną detektora CCD W kierunku ortogonalnym。Ograniczenia spektrografu prowadzą do gorszej wydajnotzci, jekjli chodzi o rozdzielczozich przestrzenną， ale zmniejszajj3c liczbę optyki w konfiguracji伪konfokalnej, ogólna przepuszczalnotzic jest znacznie lepsza。
Konstrukcja hybrydowo-konfokalna (FlexFocus)
Zarówno, wysoka przepuszczalnotzic i prawdziwa konstrukcja konfokalna oferują oczywiste zalety, mikroskop Raman mozkbyich wyposaavony w hybrydową tablicę przysłonową zawierającą zestaw otworów i szczelin, które mogą dziazhak jako przyszona konfokalna。Ta hybrydowa konstrukcja zyzyw sobie zalety obu konstrukcji i umobliwia dostecpp na wachodanie do prawdziwej konfiguracji konfokalnej lub o wysokiej przepuszczalnowicci。
微视拉曼CZĘSTO ZADAWANE PYTANIA
czczsto zadawane pytania dotyczanchce mikroskopii Raman
Jakie są zalety spektroskopii Raman
Raman ma kilka głównych zalet w porównaniu do innych technik spektroskopii wibracyjnej, takich jak FTIR i近红外。W przeciwiezynstwie do absorpcji, efekt Ramana to nieelastyczne rozpraszanie wiwiattia od próbki。W rezultacie spektroskopia Raman praktycznie nie wymaga przygotowania próbki W pomiarach ciawarsaw staovich, cieczy i gazów。Nie tylko bezporetnio, ale takze przez przezroczyste materiaayy, takie jak szkzo i plastik。Woda ma bardzo niski sygnawarsaw Ramana i dlatego spektroskopia Raman moze czatwo wykryic zwizhezki rozpuszczone w wodzie bez silnych zakłóceń。To sprawia, ze spektroskopia Raman jest odpowiednia do pomiarów próbek biologicznych w stanie macierzystym。
杰克·杜戈特瓦·波兹斯卡尼·维德玛·拉曼?
Czas ekspozycji zalezy od wielu czynników, takich jak oczekiwana jakokovich spektralna, moc lasera i przekrój próbki dla rozprozenia Ramana。Zazwyczaj dobrej jakokovci widma Raman mokbna nabyich w cigu kilku sekund。
Czy widma Raman mouzna uzyskich z mieszanin?
Widmo Ramana zawiera informacje o wszystkich mierzonych czzhesteckach。Dlatego widma Ramana uzyskiwane z mieszaniny zawiera sygnazyy z różnych czzhesteczek。jeutli znane są widma składników, moutna uzyskach ilokociowe informacje o skadzie。
Co jeszcze mouzna wykryic Ramanem poza strukturą chemiczną?
Spektroskopia Raman moze dostarczyc bezpo涅雷nio lub po涅雷nio, różne informacje, takie jak izotopy w czzhesteczkach，同素异象，krystalicznotzic, polimorfizm, dopowanie w struckturze krystalicznej, napianycie, cienniie i温。
Czy spektroskopia Ramana nadaje się做分析ilokociowej ?
intensywnoovic widma jest liniowa do stzynenia。zwiitzzek miymdzy najwyższą intensywnością a stzhaeniem moebna skalibrowaic za pomocą znanych próbek。W mieszaninach sygnay Raman dostarczają ilokociowych informacji o stzheeniu związków W tym samym czasie。
Jaka jest najlepsza dugugoovic fali lasera do mojego zastosowania?
Niestety, najlepsza dugugozich fali laserowej dla konkretnego zastosowania nie zawsze jest oczywista。Aby zoptymalizowak dugugotzic fali wzbudzenia w eksperymencie Raman, nalevywzizheic pod uwagę wiele zmiennych。Są到efektywnoovic rozpraszania, wpzyw fluorescencji, wydajnoovic detektora, takeze dostzhepnotzich opbachalnego i utatwego w utyciu systemu。najczieltzciej uuzywana duugotzic fali到785 nm i/lub 523 nm。532 nm nadaje szczególnie nadaje się do materiałów nieorganicznych, takich jak grafen I fullereny。
Jaka jest typowa moc lasera do pomiarów拉曼?
Moc lasera na próbce pod mikroskopie Raman jest zawiera się w zakresie od submw do kilkudziesiichciu mW。intensywnoovic Raman jest wprost proporcjonalna do mocy lasera。Istnieje jednak zwiekkszone ryzyko uszkodzenia próbki przy uzyyciu dueyj mocy lasera。Moc lasera mokbna obnizych, aby unikniki uszkodzenia próbki, ale w ten sposób potrzebujemy duvutszego czasu ekspozycji, aby uzyskich dobrej jakowicci widma。
