OT-AFM组合系统将AFM卓越的表面力测量和成像能力与光学镊子在3D中应用和测量最小力的能力相结合。
OT-AFM组合系统将AFM卓越的表面力测量和成像能力与光学镊子在3D中应用和测量最小力的能力相结合。组合设置满足机械稳定性,灵活性和模块化的最高要求。一个特别设计的OT-AFM ConnectorStage是将纳米向导或CellHesion家族的任何AFM与纳米跟踪器光学镊子结合在研究级倒置光学显微镜上的关键。
OT提供的3D定位、检测和操作的独特组合,以及AFM的高分辨率成像和表面特性表征,开辟了全新的应用领域,如细胞反应、细胞-细胞或细胞基质相互作用、免疫反应、感染或细菌/病毒/纳米颗粒摄取过程等等。
凭借大量可用的处理,相互作用和检测位点,OT-AFM显着扩展了单分子应用的范围。
1.DNA发夹解压缩(AFM),而光阱可用于抑制(高激光功率)或量化旋转(低激光功率)。
2.扫描修饰过的DNA分子。带有DNA结合蛋白的分子(绿色)横跨在两个光学捕获珠之间。一个功能化的AFM尖端(蓝色)沿着分子扫描,每当dna连接的蛋白质和尖端之间发生相互作用时,这些都可以在AFM和OT信号中检测到。
3.dna -酶(如聚合酶、解旋酶)动力学监测。将其中一条链连接到光学捕获的粒子上,就可以跟踪其逐级运动。闭环力夹紧允许在单链上保持恒定的力。
细胞反应、细胞-细胞或细胞基质相互作用、免疫反应、感染或细菌/病毒/纳米颗粒摄取过程只是JPK最新的最先进的ott - afm平台可以研究的几个例子。JPKs经过验证的AFM和OT核心技术,结合荧光显微镜,为活细胞应用设定了最终基准。
[1] +[2]:细胞活化与功能化珠,平行AFM测量。微粒表面的信号分子在确定的位置和时间点与细胞接触。
[5] +[6]:机械敏感细胞受到周期性力的刺激,这是由光学捕获的粒子施加的。细胞骨架的内部重排改变了细胞的力学特性。这些属性很容易使用AFM方法,如力映射或JPK的定量成像高级(QI-Advanced)。
AFM可以同时用于监测细胞结构的变化,例如通过监测整个过程中的机械性能或通过分子识别力谱来研究膜蛋白的分布和机械行为。雷竞技怎么下载
通过使用功能化颗粒或修饰的微生物来触发细胞反应是一种常用的方法。由此产生的细胞结构、动力学和力学性能的变化可以使用基于原子力显微镜的方法进行研究。然而,将对象传递到细胞上感兴趣的特定区域是非常困难的。OT提供了在精确的时间和地点操作样品和触发细胞反应的完美工具。这大大提高了这些研究的通量、灵活性和可重复性。在这个应用中,树突状细胞(dc)和调节性T细胞(T注册)对常规T细胞(Tconv)对同一DC进行OT-AFM定量。
树突状细胞(DC)与常规T细胞(T)的黏附实验conv)。Tconv连接到无悬臂梁上,然后接近表面约束DC。将悬臂梁拉起,测量其附着力。调节性T细胞(T注册)用光学镊子连接到直流上并从直流上取下,以测试其对结合强度的影响。[2]+[3]测量设置。光阱(红色叉)移动T注册而附着力测量是用悬臂连接的Tconv.[4]支队工作测量为三种情况。Treg附着减少DC-Tconv交互。在T之后注册去除后,附着力基本恢复。样本由北京卡尔加里大学/清华大学闫石提供。原实验由闫石等人设计(已出版)。
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